Faza e lëvizshme është e barabartë me fazën e lëngshme të gjakut, dhe ka gjëra të ndryshme për t'u kushtuar vëmendje gjatë përdorimit. Midis tyre, ka disa "kurthe" të cilave duhet t'u kushtohet vëmendje.
01. Matni pH-në e fazës së lëvizshme pas shtimit të tretësit organik
Nëse matni pH me një aditiv organik, pH që merrni do të jetë i ndryshëm nga ai para se të shtoni tretësin organik. Megjithatë, gjëja më e rëndësishme është të jesh konsistent. Nëse matni gjithmonë pH pas shtimit të tretësit organik, sigurohuni që të tregoni hapat në metodën që përdorni, në mënyrë që të tjerët të ndjekin të njëjtën metodë. Kjo metodë nuk është 100% e saktë, por të paktën do ta mbajë metodën konsistente. Kjo mund të jetë më e rëndësishme sesa marrja e një vlere të saktë të pH.
02. Nuk përdoret buffer
Qëllimi i një tampon është të kontrollojë pH dhe të parandalojë ndryshimin e tij. Shumë metoda të tjera ndryshojnë pH-në e fazës së lëvizshme, gjë që mund të shkaktojë ndryshime në kohën e mbajtjes, formën e pikut dhe përgjigjen e pikut.
Acidi formik, TFA, etj. nuk janë buferë
03. Mospërdorimi i buferit brenda intervalit normal të pH
Çdo tampon ka një gjerësi prej 2 njësi pH, brenda së cilës siguron stabilitetin më të mirë të pH. Buferët jashtë kësaj dritareje nuk do të ofrojnë rezistencë efektive ndaj ndryshimeve të pH. Ose përdorni një tampon në diapazonin e duhur, ose zgjidhni një tampon që mbulon gamën e pH që ju nevojitet.
04. Shtoni pufer në tretësirën organike
Përzierja e një solucioni buferik me një fazë organike ka shumë të ngjarë të shkaktojë precipitimin e tamponit. Në shumë raste, edhe nëse ka pasur reshje, është ende e vështirë të zbulohet. Mos harroni të shtoni gjithmonë tretësirën organike në fazën ujore, e cila mund të zvogëlojë shumë mundësinë e precipitimit buferik.
05. Përzieni gradientin e përqendrimit nga 0% me një pompë
Pompat e disponueshme sot mund të përziejnë në mënyrë efektive fazat e lëvizshme dhe degazimin në linjë, por jo të gjithë që përdorin metodën tuaj do të kenë një pompë me cilësi të lartë. Përzieni A dhe B në një tretësirë të vetme dhe vendoseni 100% në linjë.
Për shembull, 950 ml përzierje fillestare organike mund të përgatitet duke u përzier me 50 ml ujë. Avantazhi i kësaj është se mund të zvogëlojë ndryshueshmërinë midis HPLC-ve dhe të zvogëlojë mundësinë e flluskave dhe reshjeve në sistem. Vlen të përmendet se raporti i përzierjes së pompës është 95:5, që nuk do të thotë se koha e mbajtjes së parapërzier në shishe është gjithashtu 95:5.
06. Mospërdorimi i acidit (bazës) të modifikuar saktë për të ndryshuar buferin
Përdorni vetëm acidin ose bazën që formon kripën tampon që po përdorni. Për shembull, një tampon i fosfatit të natriumit duhet të përgatitet vetëm me acid fosforik ose hidroksid natriumi.
07. Mos deklarimi i të gjitha informacioneve në lidhje me buferin në metodë, si p.sh. shtimi i 5 gfosfat natriumi në 1000 ml ujë.
Lloji i tamponit përcakton gamën e pH që mund të zbutet. Përqendrimi i kërkuar përcakton forcën e tamponit. 5 gram ose fosfat natriumi anhidrik dhe 5 gram monohidrat monosodium fosfat kanë fuqi të ndryshme tampon.
08. Shtimi i tretësve organikë përpara kontrollit
Nëse metoda e mëparshme përdori një zgjidhje tampon për vijën bazë B dhe metoda juaj përdor një zgjidhje organike për bazën B, ju mund të shpresojmë që ta vendosni tamponin në tubin e pompës dhe kokën e pompës.
09. Ngrini shishen dhe zbrazni pikën e fundit
Ekziston një shans i mirë që nuk do të keni mjaftueshëm fazë të lëvizshme për të përfunduar të gjithë drejtimin dhe mostra juaj do të pijë duhan. Përveç mundësisë së djegies së sistemit dhe kolonës së pompës, faza e lëvizshme do të avullojë plotësisht dhe faza e lëvizshme në pjesën e sipërme të shishes do të ndryshojë.
10. Përdorni fazën celulare të degazimit tejzanor
Pika më e rëndësishme është të siguroheni që të gjitha kripërat tampon janë tretur, por kjo është mënyra më e keqe për të degazuar dhe do të ngrohë shpejt fazën e lëvizshme, duke shkaktuar avullimin e përbërësve organikë. Për të kursyer probleme të panevojshme më vonë, merrni pesë minuta për të filtruar me vakum fazën tuaj celulare.
Koha e postimit: Gusht-27-2024